運用液相色譜儀HPLC體系杰出運行的第三個關(guān)鍵是堅持體系的清潔。你需求重視活動相流經(jīng)該體系的一切當?shù)兀P(guān)于這些當?shù)亟?jīng)常性的沖刷，將使你的體系堅持在“Ready”狀態(tài)。

1、活動相儲液瓶

首先要經(jīng)常清洗活動相儲液瓶，或者每做一批新樣品替換一次活動相。一個臟的儲液瓶將會污染注入的活動相。主張儲液瓶中緩沖液運用時刻不要超過一周，而有機溶劑運用時刻不要超過一個月。也有人主張儲液瓶中堅持用溶劑充溢，直到替換剖析方法儲液瓶需替換新溶劑（活動相組成發(fā)生變化）時，將舊溶劑倒掉替換新溶劑，這樣勝于將溶劑用完。但這關(guān)于剖析樣品量少的實驗室而言似乎有些糟蹋。儀器公司的工程師主張儲水瓶的水要天天換，每周瓶子還應(yīng)該用異丙醇清洗一次。有的實驗室則在水里加入0.1～1 mM的甲酸抑制微生物的成長。這些做法看起來有些繁瑣，但卻能起到“磨刀不誤砍柴工”作用。

2、泵

接下來要沖刷的是泵。千萬不要一剖析完沖幾分鐘后就停泵，特別是當活動相中含有難蒸發(fā)的緩沖液（如磷酸鹽）時。假如儀器不是連續(xù)運用，當活動相蒸發(fā)時，難蒸發(fā)物就會粘在活塞密封墊的外表，難蒸發(fā)物將構(gòu)成固形物堆積。這是泵密封墊磨損和單向閥滲漏的主要原因之一。所以，無論運用長短，在停泵以前一定要用非緩沖液活動相沖刷泵在半個小時以上，要是活動相中有難蒸發(fā)緩沖鹽則主張沖刷的時刻應(yīng)該更長些。

3、自動進樣器

自動進樣器也要按規(guī)則清洗。現(xiàn)在的儀器多配有自動進樣器的沖刷液瓶，一般只需注意及時替換、彌補沖刷液即可。自動進樣器用的洗滌液也要采用與活動相相同的方式處理，并根據(jù)溶劑的有用期和規(guī)則，清洗儲液瓶或替換洗滌液?，F(xiàn)在的自動進樣器設(shè)置、操作都很簡單，假如時刻允許（特別是利用夜間運行），每次剖析完后設(shè)置進1、2針純?nèi)軇ㄈ缂状?、乙腈），也是一個好做法。

4、色譜柱 

對色譜柱的污染是隨運用時刻而增加。一般表現(xiàn)是：運行走基線時在記載的色譜圖中基線噪音增加，泵壓也增加。解決這個問題的zui有用方法就是在每一批樣品剖析完畢后或預備卸下柱子時用大量的活動相沖刷柱子（例如，甲醇、乙腈和水）。用梯度沖刷作用更好，具體的份額要根據(jù)柱子的說明書和性質(zhì)而定。

5、檢測器

假如是正常運用，檢測器將根據(jù)其性質(zhì)并按照說明書規(guī)則進行洗。例如UV/VIS檢測器或FL檢測器，在對柱子和體系進行沖刷時也就一同對檢測器流通池中污染物進行了清洗?？墒钦舭l(fā)光檢測器或質(zhì)譜儀則需求按照說明書進行定時清洗。這些檢測器在運用時會有難蒸發(fā)污染物堆積，如質(zhì)譜儀離子源的噴針、毛細管、錐孔板、預四極等部件，因此需求定時清洗。并且對聯(lián)有這些檢測器的體系沖刷時，zui好與這些檢測器斷開，以減少對檢測器的污染。

總歸，實驗室日常運用的液相色譜儀要是能認真做好這三項工作——脫氣、過濾和沖刷，你的儀器可以得到杰出的預防性維護，運用時就會感到比較順手。當然，在實際操作時遇到的問題并沒有這么簡單，但這三個杰出習慣將是正確操作、運用HPLC體系的基礎(chǔ)。