1. 目的

使操作人員的操作步驟規范化。

2. 適用范圍

適用于儀器安裝、調試、校準后正常狀態下進行的操作。

3. 責任者

質控科儀器分析員對此規程負責。

4. 規程

 4.1清洗液、流動相、封柱液預處理

•  4.1.1所有清洗液、流動相、封柱液在使用前均需過濾、脫氣以及混合均勻。

•  4.1.2甲醇-水（10：90）、乙腈-水（10：90）、超凈水、乙腈均需存放在棕色溶劑瓶中。

•  4.1.3含有乙腈的溶液以及不含乙腈但含有較高比例的其他有機溶劑的溶液在過濾時需使用有機相微孔濾膜，其它溶液在過濾時需使用水相微孔濾膜。

•  4.1.4存放清洗液、流動相、封柱液的溶劑瓶在每次裝入溶液前需用少量過濾好的該溶液清洗數次。

•  4.2接通電源,開啟連機電腦,再接通儀器電源,儀器自檢完畢，處于準備進行狀態。雙擊桌面圖標“儀器1聯機”，打開Agilent 1200化學工作站，在左上角下拉框中選擇“方法與運行控制”界面。顯示如下圖標：
  
  

注意：一定要先雙擊“儀器1聯機”圖標，進入聯機狀態，方可雙擊“儀器1脫機”圖標，同時進入脫機界面。否則，將無法聯機。

  4.2泵

• 4.2.1 準備清洗液并裝入溶劑瓶中，將吸濾器放入瓶內。安裝所需用柱子。

• 4.2.3 將吹掃閥（即“Purge”閥）打開，單擊泵圖標 ，選擇“設置泵”，將“流速”設置為3.00ml/min。選擇清洗液所在通道（建議為A通道），單擊“確定”，在“系統視圖”中單擊“啟動”運行泵，泵運行10分鐘后，觀察壓力，應小于10bar，若大于此壓力，應更換purge閥濾芯，調節流速1.00ml/min。

• 4.2.4關閉purge閥，觀察柱壓是否正常。

• 4.2.5選擇“控制”，在“用于泵密封墊清洗的泵”（Seal Wash）中選擇“定期清洗”，“周期”設置為5min，“持續”設置為0.1min，同時觀察試劑架中10%異丙醇是否充足，相應的廢液瓶是否有充足空間。

• 4.2.6 根據“柱使用記錄中所規定的方法”清洗柱子約30分鐘后，在“控制”組中的“泵”選項中選擇“待機”，待系統壓力降到10bar以下后，更換流動相，在“控制”組中的“泵”選項中選擇“啟動”改用流動相平衡柱子，約30分鐘后柱子處于平衡狀態。設定所需流速，在“停止時間”中設定所需運行時間，在“后運行時間”設定所需后運行時間；選擇“溶劑”項，設定各通道比例，單擊“確定”。

• 4.2.7 如進行梯度分析，在“設置泵”組中選擇“時間表”，單擊“追加”，根據具體方法進行時間和相應的參數設置
  
  4.3 柱溫箱
  

• 4.3.1在系統視圖中，單擊柱溫箱圖標，并從菜單中選擇“設置柱溫箱”，設置“溫度”選項，單擊“確定”。

• 4.3.2在實驗開始時，用清洗液清洗柱子時，應同時開啟柱溫箱；在實驗結束時，用清洗液清洗柱子時，應關閉柱溫箱，讓柱子隨著清洗過程慢慢冷卻。要避免到封柱過程結束后才關閉柱溫箱，這會導致柱的壽命減短。
  
  
  4.4自動進樣器

• 4.4.1在系統視圖中，單擊自動進樣器圖標，從菜單“設置進樣器”，在“進樣”組中，選擇“洗針進樣”，清洗瓶通常設為“91”；在最優化中設為“無”。

• 4.4.2 清洗瓶中的清洗劑通常為濾過的超凈水，只需蓋瓶蓋，無需放置墊片。
  
  

  4.5可變波長檢測器（VWD）

• 4.5.1在系統視圖中，單擊檢測器圖標，并從菜單中選擇“設置VWD信號”，在“信號”組中設置波長，在“峰寬（響應時間）”組中，單擊下拉列表并選擇“>0.1min（2s）”，單擊“確定”。

• 4.5.2在“控制”組中，選擇關閉或打開氘燈。一般情況下，待到系統走流動相時即打開氘燈預熱；分析結束時，用清洗液清洗柱子時，即時關閉氘燈。

  4.6“自動進樣器”、“柱溫箱”、“檢測器”中的時間表設置均與“泵”一致。

  4.7 上述“自動進樣器”、“泵”、“柱溫箱”、“檢測器”的相關參數設置完畢后可在主界面選擇“方法”，選擇“方法另存為”保存方法，以后使用時可選擇“調用方法”。

  4.8 序列

• 4.8.1在“方法和運行控制”視圖中，單擊主工具欄上的，切換至“序列”面板，點擊“儀器控制”。

• 4.8.2單擊選擇“序列參數”出現如下對話框：

“操作者姓名”一般填寫姓名的首字母集合；“數據文件”選擇“自動”；子目錄填寫“xxyyzz-aaa”，其中xxyyzz為6位數的年月日組合，aaa為品名的首字母集合；“運行部分方法”選擇“依據運行時選項表”；“等待時間”設置為0min；“未就緒超時”設置為0min；如該序列要走過夜，在“關閉”選擇“序列運行后命令/宏”，如果所用的儀器為單元泵，選擇“LAMPALL OFF”,如果所用的儀器為四元泵，選擇“macro SHUTDOWN MAC,go”

• 4.9.3單擊“確定”。

• 4.9.4單擊“序列“面板，出現如下對話框，設定序列表。

在“樣品瓶“中輸入樣品瓶位置“1～99”；在樣品樣品名稱中輸入相應樣品名稱，具體參見附件一；在方法名稱中輸入相應的方法名稱，具體參見附件二；在“進樣次數/瓶”輸入所需進樣的次數；使用“插入”、“追加一行”和“剪切”按鈕編輯序列行數，單擊“確定”。

• 4.9.5單擊主界面上的“序列”，選擇“保存序列”，保存所設置的序列。
  
  

  4.10 數據分析

• 4.10.1在“視圖”中選擇“數據分析”將主界面切換到數據分析。

• 4.10.2單擊，切換至積分工作區。

• 4.10.3選擇“調用信號”調用所需的信號。

• 4.10.4在“積分/報告”工具欄中，單擊切換到積分事件表。其中，基線校正可以設置為“經典”或“高級”，在進行有關物質分析時設置為“高級”；斜率靈敏度在有關物質分析時設置為“0.5”，其他分析時設置為“1”；峰寬設置為“0.04”；“最小峰面積”和“最小峰高”在有關物質分析時均設置為“0”，其他分析時可設置適合的數值；“肩峰”選擇“關閉”；“ 信號指定事件”選擇“VWD缺省”。單擊保存已修改的積分事件表并關閉積分工作區。

• 4.10.5單擊打開“保存方法”對話框保存方法。

• 4.10.6單擊放大光標查看積分基線，單擊縮小至初始大小。

  4.11樣品分析

待基線走平穩后，在序列“儀器控制”主界面點擊“開始”進樣。

  4.12儀器及柱子清洗

根據“柱使用記錄中所規定的方法”清洗柱子及流路，注意一般甲醇-水（10：90）、乙腈-水（10：90）不超過60分鐘。再用10倍柱體積封柱液清洗柱子及流路。退出工作軟件并保存數據，關機。

5. 維護

  5.1泵

• 5.1.1主動入口閥濾芯，每6個月清洗一次。
  

• 5.1.2溶劑過濾器，每3個月清洗一次。
  

• 5.1.3 泵密封墊、柱塞桿每2年清洗一次。
  
  

  5.2自動進樣器

• 5.2.1針頭，每6個月清洗一次。
  

• 5.2.2針座，每6個月清洗一次。
  

• 5.2.3轉子密封墊，每6個月清洗一次。
  

• 5.2.4 計量泵，通常不進行維護，除非發現進樣量精密度降低或計量設備泄漏。
  

  5.3柱溫箱，進行必要的清潔。

  5.4 檢測器

• 5.4.1 氘燈，當不能點亮或者漂移超過范圍是更換。

• 5.4.2 流通池，噪聲、滲漏、光強度降低時進行清洗。