一、系統啟動與參數初始化

三重四極桿質譜儀開機需遵循嚴格的真空建立流程，通常需要3-4小時使質譜端真空度達到10−510^{-5}10−5Torr以下（安捷倫7000系列標準）。關鍵啟動步驟包括：

1. ?氣源校驗?：確認載氣（氦氣純度≥99.999%）壓力穩定在0.5-0.7MPa
2. ?溫度梯度設置?：
   • 離子源溫度：230±5℃（ESI源）
   • 傳輸線溫度：280-300℃
   • 碰撞室溫度：35±1℃
3. ?質量校準?：采用全氟三丁胺(PFTBA)標準品進行質量軸校準，確保質量偏差<0.1Da

二、樣品前處理與色譜分離

1. ?復雜基質處理?：

   • 生物樣本采用改良QuEChERS方法（如EN15662標準），回收率需≥80%
   • 環境水樣通過固相萃取(SPE)富集，C18柱活化采用6ml甲醇+6ml水

2. ?超高效液相色譜(UHPLC)優化?：

   ?參數?	?典型設置?	?作用?
   色譜柱	1.8μm C18柱(100×2.1mm)	亞2μm填料提升分離效率
   流動相A	0.1%甲酸水溶液	改善峰形，抑制電離
   流動相B	乙腈（含0.1%甲酸）	梯度洗脫提升分離度
   流速	0.3mL/min	平衡柱壓與分離效率

   梯度程序示例：0-2min 20%B → 8min 45%B → 10min 95%B → 12min 20%B

三、質譜分析核心工作流程

1. ?離子化過程?：

   • ESI源電壓：±3.0kV（正/負離子模式）
   • 霧化氣壓力：50psi
   • 干燥氣溫度：350℃
     離子化效率公式：Ieff=nionnmol×ηtransI_{eff} = \frac{n_{ion}}{n_{mol}}×η_{trans}Ieff?=nmol?nion??×ηtrans? 其中nionn_{ion}nion?為生成離子數，nmoln_{mol}nmol?為進樣分子數，ηtransη_{trans}ηtrans?為傳輸效率

2. ?三重四極桿協同工作?：

   • ?Q1（質量篩選）??：選擇特定m/z的母離子，分辨率設定為0.7FWHM
   • ?Q2（碰撞誘導解離CID）??：充入高純氮氣（5psi），碰撞能量(CE)10-40eV可調
   • ?Q3（子離子選擇）??：篩選特征碎片離子，駐留時間50-200ms/通道

3. ?多反應監測(MRM)優化?：

四、數據分析與質量控制

1. ?定量分析方法驗證?：

   • 線性范圍：5-6個數量級（R²≥0.995）
   • 精密度：日內RSD<10%，日間RSD<15%
   • 準確度：加標回收率85-115%

2. ?實時監控指標?：

   • 基線噪音：<±1×10??AU
   • 壓力波動：<1%設定值
   • 離子豐度比：標準品特征離子偏差≤20%

3. ?系統適用性測試(SST)??：
   每批樣品分析前需運行標準品，保留時間偏差≤±0.5%，峰面積RSD<5%

三重四極桿質譜儀通過母離子-子離子的雙重篩選機制，結合UHPLC的高效分離，可實現復雜基質中pg/mL級物質的精準定量。其工作流程嚴格遵循ISO 17025和FDA 21 CFR Part 11規范，在藥物代謝、環境污染物檢測等領域具有不可替代的優勢。

典型MRM參數示例（以人參皂苷Rb1為例）： - 母離子 m/z 1107.6 ([M+H]+) - 子離子 m/z 783.4（定量離子，CE=30eV） - 子離子 m/z 945.5（定性離子，CE=25eV） - 離子對比率偏差需<20%[7](@ref)